Hepatit C är en infektion i levern som orsakas av Flaviviridae HCV-viruset, som består av en eller flera RNA-molekyler. Som regel vidtas en rad diagnostiska åtgärder för att fastställa hepatit C hos en patient. PCR är en analys som korrekt bekräftar diagnosen. Ofta kommer slutsatsen av läkare när patienten redan har de första tecknen på sjukdomen.
Vad är hepatit C
Leverskada av en virusinfektion som överförs genom blod eller sexuell kontakt kallas inom medicinen hepatit C. Orsaken är ett RNA-innehållande virus av icke-cellulära infektionsämnen från Flaviviridae-familjen. Infektionen kan stanna kvar i kroppen länge utan att visa sig. Därför, endast när en mikroorganism detekteras med ett blodprov med PCR RNA RNA, anses hepatit C (som en diagnos) vara motiverad.
Flavivirus produceras inte i artificiellt odlade isolerade celler. I reproduktionsprocessen skapar det smittsamma ämnet immunologiskt distinkta modifieringar. Dessa faktorer hindrar kroppen från att gelämpligt skyddssvar och experter har svårt att utveckla ett effektivt vaccin.
Viruset överförs parenter alt. För infektion måste den komma in i tillräckliga mängder direkt i blodomloppet.
Vilka tester görs för hepatit C
Virala patologier i levern diagnostiseras med hjälp av laboratorietester. Kliniska studier av hepatit C genomförs genom att studera främmande och farliga antigener eller proteinföreningar (antikroppar) i patientens biomaterial, främst i blodet.
- Enzymatisk immunanalys (ELISA). Metoden bygger på detektering av lgM-antikroppar i blodet. Immunglobulin anses vara den största och är en pentamer. Det manifesterar sig i lymfocyternas primära skyddande svar på en okänd främmande substans.
- Radioimmunoassay (RIA) - kvantitativ bestämning av lgM-immunoglobulin med användning av en märkt radioaktiv isotop av jod.
- PCR av hepatit C - bestämning av vir alt RNA i biomaterialet (blod). Denna analys bekräftar tillförlitligt diagnosen.
IgG-testning är inte tillförlitlig. Dess närvaro i blodserumet kan indikera inte bara närvaron av ett flavivirus, utan också en annan tidigare infektion som har samma patogen.
Vad avgör PCR-analys
Polymeraskedjereaktion (PCR) är baserad på identifiering av DNA-regioner som är specifika för vissa patogener i prover av material för forskning (epitel, blod). Analysen gör det möjligt att identifiera patogena minsta organismer (virus) genom att detektera deras RNA eller DNA i biologiskt material.
Laboratorieförfarande för detektion av antikroppar Hepatit C PCR utförs i 3 steg:
- Välj. Det studerade biomaterialet renas från föroreningar och DNA erhålls i den mobila fasen av den kromatografiska kolonnen.
- Förstärkning. Analysen utförs i enhet-termostatcyklern. Den värmer och kyler provrören med en viss cyklicitet. För en studie utförs upp till 35 cykler. Resultatet är ett tillräckligt antal DNA-fragment för att detektera, identifiera och utvärdera patogenen.
- Elektrofores. De resulterande fragmenten placeras i en gel med olika mättnad av agaros och elektrofores utförs. Det resulterande elektroferogrammet analyseras på en dator.
Inte bara standard-PCR-studien används, utan även re altids-PCR-analysen. Detta är re altidsdiagnostik. Metoden möjliggör kvalitativ och kvantitativ analys, vilket gör det möjligt att identifiera sjukdomens bildning och dynamik, samt ordinera terapi som syftar till att eliminera orsaken till patologins ursprung. Re altids-PCR används också för att bestämma en renodling av smittämnen (genotypning).
Hur går polymeraskedjereaktionstestet
För diagnos kan vilken mänsklig biologisk vätska som helst användas. Biomaterial för att testa för hepatit C är vanligtvis blod.
Provtagning för diagnostik utförs i förfarandetkontor. För att ta blod, använd engångsprovrör med ett ämne som hämmar blodkoagulering. Aktiviteter inriktade på att förhindra spridning av smittämnen hjälper till att undvika att en annan stam av mikroorganismer kommer in utifrån.
Blod för PCR av hepatit C tas på morgonen på fastande mage. Provet skickas omedelbart till laboratoriet. Det är tillåtet att lagra biomaterialet vid en temperatur på +4 till +8 grader Celsius. Behållare är märkta och försedda med vägbeskrivning. Testresultaten är tillgängliga inom 48 timmar, ibland tidigare.
Typer av PCR
Användningsområdet för polymeraskedjereaktionen är ganska brett. Infektionister bestämmer med PCR hepatit B, sjukdomar som överförs av blodsugande insekter, AIDS, tuberkulos. Inom onkologi, med denna metod, upptäcks tumörceller i ett tidigt skede.
Det finns ungefär fjorton typer av analyser. Användningen av en eller annan typ beror på analysernas omfattning och slutliga resultat. Vissa typer av PCR är oumbärliga där resultatet behövs inom 20 minuter.
För att diagnostisera hepatit C används 3 typer av polymeraskedjereaktion:
- Kvalitativ bedömning kan antingen vara positiv, vilket indikerar närvaron av en infektion i kroppen, eller negativ, vilket indikerar frånvaron av ett flavivirus.
- Re altids-PCR (kvantitativ analys) - bestämmer patogenens kvantitativa RNA i IE/ml.
- Genotyping är en analys som avslöjar typen (genotypen) av viruset.
För att exakt identifiera och fastställa sjukdomen, följt avalla tre typerna av studier används för att ordinera optimal terapi.
Kvalitativ polymeraskedjereaktionsanalys
En analys är obligatorisk för alla som har en ELISA som har upptäckt antikroppar mot HCV. Den kvalitativa PCR för hepatit C är standardtestet för känslighet. Metoden syftar endast till detektion, ingen räkning eller isolering av andra ämnen utförs.
För att upptäcka antikroppar används speciella testsystem med en känslighetströskel på minst 50 IE/ml. Om antikroppar påvisas ordineras andra klargörande tester. Om resultatet är negativt kommer inga ytterligare tester att göras.
I vissa fall kan ett falskt negativt resultat bero på inkompetent labbpersonal eller reagenser av dålig kvalitet. För försäkringar är det bättre att göra om analysen någon annanstans.
kvantitativ PCR
Metoden används för att direkt studera antalet flavivirus i en reaktionscykel. För noggrann mätning används DNA-fragment som används för hybridisering eller fluorescensmärkta primrar. Det finns ett ekonomiskt detektions alternativ med SYBL Green-färgämnet. Färgen kilas in i ett litet spår i DNA:t och blir blått när det bestrålas med laser.
Koncentrationen bestäms av apparatens förstärkare i digital motsvarighet. Värdena kan variera något mellan labb och bör därför jämföras med referensvärden.
Kvantitativ PCRhepatit C hjälper till att välja den optimala dosen av läkemedel och bestämma behandlingens varaktighet. Studiens frekvens beror på sjukdomsstadiet, typen av genotyp och det föreskrivna behandlingsförloppet.
Genotypbestämning
Hepatit C-viruset har en varierande genetisk sammansättning. Många modifieringar gör det omöjligt att skapa ett vaccin och komplicerar också behandlingen. Tot alt 11 genotyper och 100 subtyper har identifierats och registrerats. I länderna i före detta Sovjetunionen, hos personer som är infekterade med hepatit C, detekterar PCR främst genotyperna 1b och 3.
I närvaro av någon av genotyperna kan cirros eller levercancer leka. Det är därför det är så viktigt att upptäcka viruset i tid.
För vissa patienter är vissa läkemedel som är utformade för att bekämpa HCV giftiga. Genom genotypning kan du bestämma typen av protein och ordinera ett effektivt läkemedel.
I resultaten av skrivtester finns en siffra med en liten latinsk bokstav som indikerar virusets genotyp. Om HCV detekteras men inte skrivs betyder det att personen har en genotyp som inte är typisk för ett visst geografiskt område.
Analysresultat
Läkaren sysslar med att dechiffrera resultaten. Endast data från flera studier (tillsammans med anamnes och undersökning) kan ge en övergripande verklig bild av sjukdomshistorien.
- Hos en frisk person upptäcker inte ett test för en kvalitativ reaktion i biomaterialet någonting. Om värdet "upptäckt" indikeras, bekräftas infektionen och patientenbehöver ytterligare diagnos följt av behandling.
- Bestämning av antalet smittämnen gör det möjligt att bedöma virusbelastningen på kroppen. Norm alt upptäcker inte kvantitativ PCR för hepatit C patogenen. En indikator på upp till 810^5 betraktas som en låg belastning och, med korrekt terapi, garanterar ett gynnsamt resultat. Högre värden kräver en djupgående undersökning och fastställande av långtidsterapi, för det positiva resultatet som ingen kan garantera.
- Positiva genotypningsresultat indikerar vilken genotyp som känns igen. Ett negativt resultat indikerar antingen frånvaron av ett flavivirus eller närvaron av en genotyp som inte är typisk för denna region.
Vad indikerar ett positivt PCR-test
All allvarlig sjukdom kräver en omfattande diagnos. En positiv hepatit C PCR bekräftar diagnosen, men förutsägelser kan endast göras efter ytterligare laboratorie- och instrumentstudier.
Detektering av ett virus ger inte en fullständig bild av patologin. Det är nödvändigt att identifiera dess typ och natur, för att bestämma hur det påverkar levern och andra organ. Tidig upptäckt av HCV har ofta ett gynnsamt terapeutiskt resultat.
Negativ PCR med positiv ELISA
När man observerar symtomen som är karakteristiska för leverskador, är det stor sannolikhet att infektionen redan har kommit in i kroppen. Därför bör du kontakta en hepatolog eller en infektionsspecialist. Under intervjuerna kommer specialisten att samla in en anamnes och ordinera den nödvändiga undersökningen.
Ifresultaten av studier på hepatit C PCR är negativa, och enzymimmunoanalysen är positiv, detta indikerar närvaron av antikroppar mot flavivirus i blodet. Detta händer vanligtvis när infektionen kommer in i kroppen i en liten mängd, så immunförsvaret klarade av det på egen hand. Men sådana människor anses fortfarande vara smittade och måste undersökas var sjätte månad. Om en person med sådana testresultat nekas gratis läkarundersökning är det bättre att ta en PCR mot en avgift för att upprätthålla hälsan, och om resultaten är positiva, kontakta en specialist för diagnos och behandling.
Fördelar och nackdelar med metoden
När man ställer diagnosen hepatit C har PCR flera fördelar:
- Tidig upptäckt av patogen.
- Exakt definition av viruset.
- Diagnostiks effektivitet.
- Minsta felfrekvens.
- Högkänslighet.
Nackdelar med metoden:
- Hög kostnad för analys. Testet kräver dyr utrustning, reagenser och högt kvalificerad medicinsk personal. Sammanlagt blir det en ansenlig summa.
- Strikta krav för transport av biomaterial.
Behandling av inflammation i levern
PCR-analys för hepatit C-virus anses vara grundläggande för diagnos, men inte definitiv. För att behandlingen ska vara effektiv krävs ytterligare ett antal laboratorie- och instrumentstudier. Efter att ha passerat alladiagnostiska åtgärder läkaren ordinerar behandling:
- Diet 5 är ordinerad.
- Alkohol är helt uteslutet.
- Gemensam mottagning av interferon och ribavirin i 25 dagar.
- Kurser av hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- I speciella fall används diskret plasmaferes.
Läkemedel som ordinerats av en hepatolog används regelbundet, utan att dosen ändras. Varaktigheten av att ta drogerna bestäms av läkaren efter att ha klarat kontrolltesterna. Efter avslutad behandling måste du besöka läkaren var sjätte månad.
PCR-diagnostik gör det möjligt att identifiera orsaken till hepatit C i ett tidigt skede. Detta bidrar till effektiviteten av terapin och förhindrandet av övergången av sjukdomen till sådana farliga former som cirros och hepatocellulärt karcinom.
