Enligt WHO:s statistik har 25 miljoner människor dött i aids under de senaste 40 åren. Skadorna från denna infektion är enorma. De flesta av de smittade visade sig vara i Afrika, där denna infektion kom ifrån. Med hiv blir diagnosen av sjukdomen särskilt relevant. Det finns visserligen inga botemedel mot hiv än, men tidig behandling kan förlänga patientens liv och förbättra dess kvalitet.
Diagnos av HIV-infektion
HIV-infektion bestäms i olika stadier med följande metoder:
- ELISA - enzymimmunanalys.
- Western blot.
- PCR - polymeraskedjereaktion.
- Snabba tester.
PCR-metoden utvecklades av den amerikanske biokemisten Kary Mullis, som fick Nobelpriset för den 1983. Idag anses denna metod inom medicin vid diagnos av alla infektioner vara den ledande på grund av dess noggrannhet och informationsinnehåll. HIV är inget undantag i detta avseende.
Käran i analysen
Alla levande celler innehåller RNA och DNA. Dessa nukleinsyror är kapabla att självkopiera och självreplikera. För varje infektion är DNA-fragment unika. PÅi biologiska vätskor cirkulerar dessa fragment av nukleinsyror. De fångas och känns igen av specialutrustning - reaktorn. Detta är grunden för metoden. Laboratorieassistenten räknar dessa fragment. Retroviruset HIV övervakas med avseende på RNA. Även med enstaka kopior av viruspartiklar kan PCR detektera och räkna dem.
Venöst blod används oftast som testvätska. Metodens speciella komponenter binder till viruspartiklarna och gör dem detekterbara, eftersom de hittade fragmenten multipliceras.
I fallet med HIV kan resultatet av virusets närvaro erhållas långt innan kliniken dyker upp. Därför, på grund av sin höga känslighet, har PCR ett så högt diagnostiskt värde. Ett stort plus med PCR är metodens mångsidighet. Inkubationstiden för infektion för PCR är inget hinder.
Forskningskostnad
PCR-metoden är ganska dyr. Detta är en av dess stora nackdelar. Det kräver den senaste utrustningen och högt kvalificerad laboratorieassistent. Med hänsyn till det föregående utförs inte PCR-diagnostik i små bosättningar. Du kan bara testas på specialiserade stora kliniker.
Kostnaden för HIV-DNA-testning på kliniker i Moskva börjar från 2 800 rubel, virusmängden (vir alt RNA i plasma) bestäms av PCR - från 8 800 rubel, och HIV-resistens mot proteashämmare - från 16 500 rubel. Som ni ser är priserna ganska höga. PCR kan göras kostnadsfritt på offentliga kliniker enligt MHI-policyn. Viktig,att förfarandet kan göras anonymt. I registret får patienten ett nummer med vilket han kan ta reda på resultatet. I moderna vårdcentraler finns det personliga konton för klienter där dessa uppgifter kommer att föras in.
Forskningsmål
PCR-diagnostik för HIV ordineras i sådana fall:
- Detektering av infektion hos ett barn född av en sjuk mamma eller bärare för att fastställa intrauterin infektion.
- Om ELISA gav tveksamma resultat (PCR för HIV hjälper i det här fallet att ställa en slutlig diagnos).
- För att upptäcka det kvantitativa innehållet av viruset i kroppen.
- Med en positiv immunoblot kompletterar de varandra med PCR.
- Testar donatorer.
- För tidig diagnos av HIV.
- För att fastställa effektiviteten och resistensen mot ART.
Fördelen med denna analys är att PCR för HIV kan utföras även för barn under ett år.
Forskning utförs ofta inte för primär diagnos, utan redan i behandlingsprocessen. Primär diagnostik är serologiska studier (de bestämmer nivån av antikroppar mot HIV). Om ett falskt positivt resultat upprepas kan detta vara med låg virusmängd.
PCR diagnostiserar hiv när det inte finns några antikroppar mot det ännu. ELISA-metoden i det här fallet ger inget svar.
Och PCR för HIV kommer redan att vara positiv. Men symptomen på denna period av HIV är ospecifika. Patienten behandlas först under lång tid och utan framgång för ARVI av en allmänläkare. Man bör komma ihåg att diagnosen hiv endast baseras påPCR sätts inte, det är nödvändigt att klara andra omfattande tester. PCR-metoden är oftare hjälpmedel för svåra fall.
Förbereder för analys
Innan du tar PCR för HIV, 2 dagar före testet, bör du inte äta fet mat, alkohol. Det är också bättre att inte anstränga sig ment alt och fysiskt. Om patienten ordineras en immunstimuleringskur, stoppas den 2 veckor före analysen.
Blod tas bäst på morgonen. Andra biologiska vätskor i kroppen (spermier, vaginal sekretion) kan också undersökas, men blod är det bästa materialet. Saliv, svett, urin och tårar används inte, eftersom innehållet av virus i dem är minim alt.
Plus av PCR för HIV
Fördelarna med metoden är den extremt låga sannolikheten för ett falskt positivt resultat, universaliteten hos reaktionen för alla biologiska vätskor i kroppen. Analys har ett brett utbud:
- En blodtagning kan användas för att upptäcka olika infektioner.
- Tekniken är brådskande, resultatet är klart redan nästa dag.
- Konfidensen är mellan 85 och 98%.
- Närvaron av HIV kan fastställas 10-14 dagar efter infektion (det finns inga antikroppar för närvarande ännu).
- Ingen åldersgräns, kan utföras direkt från födseln.
Nackdelar med metoden
Nackdelarna med PCR är följande:
- Kostnad för analys.
- Kräver sofistikerad medicinsk utrustning.
- Kräver högkvalificerad laboratorieassistent och läkare,taker analys.
- Reaktionen är mycket känslig, så felet kan vara 20%.
- Kan resultera i ett falskt positivt resultat om patienten har autoimmuna processer, onkologi, kroniska infektioner.
- Särskild renhet av laboratorielokalerna är nödvändig, eftersom viruset kan komma in i analysen från luften. Då blir resultatet fel.
För laboratorier som utför PCR, för att förbättra kvaliteten på diagnostik, har särskilda strikta åtgärder utvecklats enligt SanPiN-systemet för intern kontroll. Dessutom måste alla arbetsregler med denna teknik följas:
- Krävs för att strikt följa informationen på provrören.
- Innan blodprov tas, titta igen och se till att analysen är schemalagd.
- Sköterskan måste märka rören korrekt.
- Laboratorieassistenten måste utföra alla manipulationer med biomaterialet korrekt för att förhindra korskontaminering.
- Testsystemet måste vara av utmärkt kvalitet.
Endast om alla dessa villkor är uppfyllda kan felet i svaret bara vara cirka 2 % av avsnitten.
Analys varaktighet
Många är intresserade av hur länge PCR för HIV kommer att vara redo. Diagnosen varar inte mer än 8 timmar. Patienten kan få svar redan nästa dag. Expresstestning utförs inom 2 timmar.
PCR-tillförlitlighet
Trots dess många fördelar anses inte PCR vara en idealisk diagnostisk metod. Han kontaktas i så fallbehovet av att få screeningtest för förekomst av HIV i kroppen.
När tas blod för analys?
Hur lång tid ska jag ta PCR för HIV? Ett tillförlitligt resultat kan erhållas redan när man tar blod 4-4 dagar efter den påstådda infektionen. Efter 2 veckor kommer tillförlitligheten för HIV att vara 98%, och med en period på 5 dagar - 80%. Förekomsten av ett negativt resultat i PCR för HIV kommer att vara tillförlitligt, men för ett absolut korrekt resultat utförs även ELISA.
ELISA-analys kommer endast att vara effektiv om det finns antikroppar mot viruset, denna tid kan ta från 1-3 månader till sex månader. Eftersom ELISA ger en högre sannolikhet (98% -99,9%) kan PCR inte kallas ett 100% bekräftande test för förekomst av HIV-infektion. Men å andra sidan är detta den enda tekniken där du inte behöver vänta på att antikroppar dyker upp.
Med HIV kan PCR ge information om effektiviteten av ART, stadium av HIV-sjukdom och antalet VN (en kvantitativ bedömning av förekomsten av HIV i kroppen). Detta kommer att tala om förändringens svårighetsgrad och omfattning.
PCR-testning för HIV är också nödvändigt om det finns antikroppar i blodet, men deras närvaro indikerar inte tillförlitligheten av HIV-infektion kliniskt.
De testas inte bara för infektion och tillfälligt sex. Andra tillfällen:
- Planerar graviditet.
- Kommande operation.
- Casual sex.
- Vissa yrken kräver det här testet för antagning till arbete (lärare, läkare och annan medicinsk personal).
- Fångar.
- TB-patienter.
- Anställda vid ministeriet för nödsituationer och polisen.
- Återvänd från semester från exotiska länder (om du vill försäkra dig om att det inte finns någon infektion).
- Prostituerade.
- Utländska studenter.
- Droger.
Också vissa symtom hos en patient kan tvinga fram ett HIV-test:
- Plötslig viktminskning.
- Diarré som varar i mer än 3 veckor
- Orimligt hög temperatur under lång tid.
- Svullna lymfkörtlar.
- Oförklarlig orsak till lunginflammation, candidiasis, etc.
Att dechiffrera analysen är den behandlande läkarens privilegium, inte laboratorieassistenten.
PCR eller ELISA, vilket är bättre?
När PCR-diagnos av HIV-virus-RNA detekteras både kvalitativt och kvantitativt. Denna analys identifierar tydligt en specifik patogen även om det finns flera korsreagerande patogener. Biologiskt material kan användas även i torkad form. Nackdelen är den höga känsligheten för PCR, när ett falskt positivt resultat kan ges genom närvaron av till och med en liten mängd främmande DNA på instrument eller ett provrör.
Uppgiften och möjligheten med ELISA är att fastställa förekomsten av antikroppar mot ett retrovirus. Även om dess noggrannhet är 99 %, är den inte tillämplig i de tidiga stadierna.
Kvalitativ HIV-testning
Högkvalitativ PCR för HIV avgör förekomsten av viruset i kroppen. Resultaten i det här fallet kommer att se ut så här: positivt, falskt positivt, negativt. Men denna studie kommer inte att ge information om mängden retrovirus. En sådan kvalitativ analysolämpligt när HIV-infektion redan har upptäckts i kroppen på annat sätt.
Det är omöjligt att kontrollera behandlingens effektivitet med högkvalitativ PCR.
HIV-kvantifiering
Utförs endast av HIV-infekterade personer för att räkna antalet kopior av virus-RNA i en biologisk produkt.
Syftet med en sådan studie är att övervaka den pågående behandlingen och identifiera virusets resistens mot det. Antiviral terapi i sådana beräkningar ordineras inte blint av en läkare, så det kommer att vara mer effektivt. Kvantitativ PCR för HIV-infektion görs mycket oftare. Denna analys visas som en kopia/ml blod.
Vilka resultat kan ges:
- Virus-RNA saknas eller är mycket litet (cirka 20 kopior/ml). Ingen säkerhet om diagnos.
- Från 20 - till 10 till 6:e gradens kopior/ml - diagnosen är tillförlitlig
- Mer än 106 kopior/ml - hög VN.
Laboratorier kan utföra PCR-testning i re altid för HIV. Detta innebär observation och numerisk utvärdering av ackumuleringen av PCR-produkter med automatisk registrering av resultat.
